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酷搏科技推出q900系列384孔高通量熒光定量PCR系統

   2023-08-04 983
核心提示:96孔熒光定量PCR儀已成為分子生物學實驗室的必備工具,但對于基因表達分析、基因分型研究(SNP/CNV)、病原體檢測、核酸藥物開發
 96孔熒光定量PCR儀已成為分子生物學實驗室的必備工具,但對于基因表達分析、基因分型研究(SNP/CNV)、病原體檢測、核酸藥物開發、測序文庫定量、作物育種等細分領域,依然存在更高通量的熒光定量檢測需求。

為此,酷搏科技于2023年夏天推出全新產品——Quantagene q900系列384孔熒光定量PCR系統,以更全面的功能、更快速的檢測、更準確的定量結果助力用戶更高效的實驗室研究。

 

產品特點

一臺優秀的熒光定量PCR儀,需要在運行快速、操作簡便的基礎上最大程度實現每個反應孔溫度、光學性能的一致,從而得到準確的檢測結果。

為了實現這一目標,q900的熱循環系統設計了3組獨立輸出的Peltier模塊,分別對加熱模塊的 3個區域獨立控制,確保不同區域間的溫度均一性。

 

反應體積5µl,全部384孔使用完全一致的反應溶液時Tm值的分布。圖中Tm最大與最小值之差為0.18°C,Tm平均值為80.52°C。

另一方面,q900 采用獨特的雙重反射靜態光學模組陣列技術。每個光學通道配置獨立的長壽命 LED光源、濾光片組和CMOS相機,雙重反射的設計在小體積的機身中延長光路,降低孔板中心和邊緣的熒光信號差異。

 
左:在q900MX上使用四種探針(藍色:FAM,綠色:HEX,黃色:ROX,紅色:Cy5)分別進行7個濃度10個梯度稀釋(n=6)的一步法四重RT-qPCR實驗。右:雙重反射靜態光學模組陣列結構示意圖。

性能展示

優秀的384孔整板Ct一致性

得益于均一的熱循環系統和穩定的光學系統,q900可以輕松實現整板Ct標準差小于0.05,有效消除邊緣效應,在任何孔位進行實驗都可以獲得相同的準確結果。

 
  實驗一 實驗二 實驗三
儀器編號 1 2 3
Ct平均值 17.775 17.783 17.580
Ct 標準差 0.022 0.020 0.031
Ct CV 0.12% 0.11% 0.18%
使用三臺不同的q900儀器進行384孔整板實驗的擴增曲線圖

大范圍濃度精準定量

q900可以在100-1010拷貝/反應范圍內進行定量檢測,穩定均一的溫控系統確保全濃度范圍高效擴增,為文庫定量、基因表達定量等應用提供更準確的數據結果。
 
儀器型號 q225 q900
擴增效率 100.1% 100.1%
R2 0.9996 0.9996

使用q225及q900進行連續2倍梯度稀釋實驗,反應體積5 μl,每一濃度三個平行反應。在Ct值為4-30的區間范圍內,q900均可以進行準確定量,且結果與q225實驗結果高度一致。

1-25μl反應體積均可適配

考慮到操作方便性,q900推薦反應體積為5-10μl。而對于樣本或試劑較為珍貴的情況,在q900上使用低至1μl的反應體系,依然可以獲得相同準確性的測試結果,配合擬合算法計算Ct值,使得相同反應體系在不同反應體積下可以獲得完全一致的Ct結果。

 
反應體積 Ct平均值 Ct標準差
20μl 17.918 0.050
10μl 17.915 0.007
5μl 17.933 0.009
2μl 17.939 0.027
1μl 17.954 0.026
 
在一個384孔板內分別使用20 μ l,10μl,5μl,2μl和1μl五種不同反應體積(圖中不同顏色對應不同體積),組分配比完全相同的反應溶液,每個體積6個平行反應時的歸一化擴增曲線。
 
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