下圖是一個典型的細胞生長曲線圖

細胞增殖的研究方法有很多，主要包括：BrdU，EdU，CCK8，MTT等方法。其中測定細胞生長曲線是檢測細胞絕對生長數的常用方法，也是判定細胞活力的重要指標，是細胞生物學特性的基本參數之一。因為細胞太小，無法測單個細胞的生長狀態，所以測細胞群體的生長曲線。

在做細胞生長曲線測定過程中，我們經常遇到以下幾個問題：

1、如何選擇細胞接種數？

答：可根據細胞傳代培養過程中接種數及細胞生長周期進行計算，細胞接種數因細胞的不同而不同。

2、細胞生長曲線測定時為什么要做重復孔？

答：測定細胞生長曲線細胞計數時選擇 3 個復孔，每孔分別計三次，取其平均值，目的是減小操作誤差。

3、細胞生長曲線測定周期是幾天？

答：一般是一個星期。

4、為什么繪制的細胞生長曲線沒有達到平臺期？

答：可能有以下原因：一是細胞接種密度過低；二是細胞培養時間過短；三是細胞生長狀態不好，使其不能正常增殖。

5、為什么細胞計數第一天，細胞數沒有增加反而減少？

答：一般細胞傳代后，會有一個生長緩慢的潛伏期，細胞不增殖，而細胞會有正常的死亡，故細胞數不增加反而減少。

6、細胞生長曲線還有其他方法繪制嗎？

答：當然有。我們提到最多的是直接計數的方法，除此以外還有相對計數的方法，該類方法首先要繪制標準曲線，標定細胞數和某個變量的函數關系，然后我們只需要測定每天這個變量的值便可以計算出細胞數。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法

實驗室細胞培養

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CELLine二室技術示意圖

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