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   2018-08-24 北京桑翌1007
核心提示:細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定,這些問(wèn)題你遇到過(guò)么?下圖是一個(gè)典型的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖細(xì)胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8
 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定,這些問(wèn)題你遇到過(guò)么?

下圖是一個(gè)典型的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖

 

細(xì)胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8,MTT等方法。其中測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)是檢測(cè)細(xì)胞絕對(duì)生長(zhǎng)數(shù)的常用方法,也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo),是細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。因?yàn)榧?xì)胞太小,無(wú)法測(cè)單個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),所以測(cè)細(xì)胞群體的生長(zhǎng)曲線(xiàn)。

在做細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定過(guò)程中,我們經(jīng)常遇到以下幾個(gè)問(wèn)題:

1、如何選擇細(xì)胞接種數(shù)?

答:可根據(jù)細(xì)胞傳代培養(yǎng)過(guò)程中接種數(shù)及細(xì)胞生長(zhǎng)周期進(jìn)行計(jì)算,細(xì)胞接種數(shù)因細(xì)胞的不同而不同。

2、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定時(shí)為什么要做重復(fù)孔?

答:測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)選擇 3 個(gè)復(fù)孔,每孔分別計(jì)三次,取其平均值,目的是減小操作誤差。

3、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定周期是幾天?

答:一般是一個(gè)星期。

4、為什么繪制的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)沒(méi)有達(dá)到平臺(tái)期?

答:可能有以下原因:一是細(xì)胞接種密度過(guò)低;二是細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短;三是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不好,使其不能正常增殖。

5、為什么細(xì)胞計(jì)數(shù)第一天,細(xì)胞數(shù)沒(méi)有增加反而減少?

答:一般細(xì)胞傳代后,會(huì)有一個(gè)生長(zhǎng)緩慢的潛伏期,細(xì)胞不增殖,而細(xì)胞會(huì)有正常的死亡,故細(xì)胞數(shù)不增加反而減少。

6、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)還有其他方法繪制嗎?

答:當(dāng)然有。我們提到最多的是直接計(jì)數(shù)的方法,除此以外還有相對(duì)計(jì)數(shù)的方法,該類(lèi)方法首先要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),標(biāo)定細(xì)胞數(shù)和某個(gè)變量的函數(shù)關(guān)系,然后我們只需要測(cè)定每天這個(gè)變量的值便可以計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法


實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)

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WIGGENS全尺寸CO2培養(yǎng)箱。培養(yǎng)箱內(nèi)設(shè)置多層活動(dòng)托板,可用于T瓶,培養(yǎng)皿,微孔板等靜態(tài)培養(yǎng);培養(yǎng)箱內(nèi)有電源插口,可以放置搖床,磁力攪拌器等用于細(xì)胞的動(dòng)態(tài)培養(yǎng)。底部有專(zhuān)用的滾瓶機(jī)滾輪槽,方便使用滾瓶機(jī)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

WIGGENS 的下列產(chǎn)品,可以放在CO2培養(yǎng)箱中使用,拓展CO2培養(yǎng)箱功能和提高利用效率:

1、 WIGGENS二氧化碳培養(yǎng)箱專(zhuān)用振蕩器,解決了二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)的振蕩問(wèn)題。獨(dú)創(chuàng)的防腐蝕,分體式設(shè)計(jì)等,滿(mǎn)足二氧化碳培養(yǎng)箱動(dòng)態(tài)培養(yǎng)解決方案。

 


振蕩器在培養(yǎng)箱中的擺放位置


2、CELLine微型細(xì)胞工廠(chǎng)專(zhuān)用于連續(xù),超高密度培養(yǎng)。既可以用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)或貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。

CELLine二室技術(shù)示意圖

3、滾瓶機(jī)用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)

  

 

4、飛旋瓶用于懸浮細(xì)胞和貼壁微載體細(xì)胞培養(yǎng),專(zhuān)用磁力攪拌器提供飛旋瓶攪拌動(dòng)力。


 
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