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上海交大基因編輯機制獲突破

   2018-07-27 上海交大1008
核心提示:上海交通大學教授吳強課題組在基因編輯機制方面獲原創進展,揭示了CRISPR/Cas9新一代基因編輯系統全新的切割機理及其在染色體重
               上海交通大學教授吳強課題組在基因編輯機制方面獲原創進展,揭示了CRISPR/Cas9新一代基因編輯系統全新的切割機理及其在染色體重排和DNA修復中的作用,實現了精準的DNA大片段編輯及可預測的堿基插入。該研究成果近日在線發表于《分子細胞》。

  CRISPR/Cas9系統是近年來在國際上興起的新一代基因編輯技術,但對Cas9核酸酶的切割原理和修復機制研究還比較少。據論文第一作者壽佳博士介紹,研究人員通過開發DNA片段編輯技術,結合高通量測序技術及蛋白質工程技術,發現Cas9核酸酶通過核酸內切酶活性切割DNA雙鏈能夠產生突出末端,而不僅僅是之前報道的平頭末端切割方式,Cas9不具有核酸外切酶活性,而僅具有核酸內切酶活性。同時發現通過基因工程改造后的Cas9核酸酶具有不同的突出末端切割模式,從Cas9核酸酶的結構上進一步證明了Cas9切割的多樣性。

  研究利用高通量測序技術對DNA片段編輯的雙鏈斷裂末端進行分析發現,斷裂末端的核苷酸加入呈現出非常有規律的模式。通過一對導向RNA分子的四種不同切割構型,結合測序技術和基因工程技術,證明Cas9介導的堿基插入在DNA片段編輯中是能夠預測的。這種可預測的染色體重排規律,為研究人類染色體異常引起的腫瘤等相關疾病提供了技術支持。

 
 
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