激光層照熒光顯微技術(light-sheet fluorescence microscopy)能夠對活體樣本進行三維成像，該技術所產生的光毒性較低，且成像速度快。
激光層照熒光顯微技術能夠以很高的三維分辨率對生物樣本進行長時間的、較為溫和的成像。特別是當該技術與高速照相機相結合時，就能夠快速地捕捉細胞或亞細胞水平上的動態變化。由于激光層照熒光顯微技術能夠快速地對生物樣本進行較為溫和的容積成像，因此Nature Mehtods將該技術評選為2014年年度技術(Method of the Year 2014)。
這一技術的基本原理非常簡單。寬場顯微技術(wide-field microscopy)或共聚焦顯微技術(confocal microscopy)需要照射或掃描成像目標物中的整個樣本，而激光層照熒光顯微技術則與這兩種技術不同，它只需要用薄層光(實際上為2D)從側邊照射樣本。隨后從樣本的上部或下部檢測所產生的熒光信號，檢測方向與薄層光線的照射方向相垂直。因此，該技術的光學層析能力(optical sectioning，即z層面上樣本結構的分辨能力)不像共聚焦成像技術那樣取決于焦點處光子的采集，而是來自于在最開始時每次僅激發一個層面上的熒光基團。換而言之，激光層照顯微技術只會激發一個焦平面上或旁邊的分子，因此大大降低了光毒性，并且提高了長時間對活體樣本進行成像的能力。
值得注意的是，如果希望激光層照成像技術達到最佳的效果，那么就需要使用較小塊的透明樣本。對于不太透明的大塊樣本而言，我們仍然必須想辦法解決散射和像差的問題。最后，激光層照成像技術的用戶仍然需要監測潛在的光毒性，雖然該技術能夠降低光毒性，但是并不代表它能夠完全消除光毒性。我們預測，在接下來令人激動的幾年里，激光層照成像技術將會在更多的生物研究實驗室中大放異彩。
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