北京博奧晶典生物有限公司張巖博士
儀器信息網:貴公司這套快速檢測平臺主要采用什么技術?
張巖博士:恒 溫擴增技術以及微流控芯片技術。博奧是國內唯一具備國際先進的微加工生產工藝的公司,微流控碟式芯片是博奧的專利技術,恒溫擴增儀是我們第一款應用微流控 芯片技術的擴增產品,微流控碟式芯片具有多指標并行檢測、樣品及試劑用量少的特點。博奧采用恒溫擴增技術,因為恒溫擴增反應不需要90度以上的高溫變性過 程,只是在50-60度之間反應,并且微流控芯片的結構設計有液封的效果,反應液的揮發并不嚴重,因此具有各檢測孔反應均一、結果可控的優勢。
晶芯®RTisochipTM-A恒溫擴增微流控芯片核酸分析儀及其微流控蝶式芯片
儀器信息網:此款微流控恒溫擴增儀是否專門定位食品安全監測領域?相對傳統實時熒光定量PCR技術,微流控恒溫擴增儀在食品安全檢測領域有何應用優勢?
張巖博士:這個平臺能夠很好的滿足食品安全快速檢測的需要,是一個基于檢測微生物的平臺,同樣也應用在臨檢,如呼吸道病原微生物檢測,以及農業、奶制品、水質等病原微生物的檢測。
大家都知道,傳統方法檢測食源性微生物呢,一次只能檢一個指標,而微流控碟式芯片上的24個檢測通道,可以進行多指標的并行檢測。并且通道之間完全隔 離,不接觸空氣,因此避免了交叉污染。另外,從實驗成本控制角度來講,碟式芯片上每個樣品反應量僅需1.4μL,相應的試劑用量也減少到了幾微升,更符合 目前快速檢測領域的需求。
恒溫擴增技術在食品安全檢測方面的實際應用主要都是用來定性,其多個引物的設計能帶來更高的特異性,反應快, 實驗操作也非常簡單,因此很適合快速檢測。關于這兩種技術的優劣勢比較,行業內人士也都比較了解,我這里就不多作介紹,我們的技術創新主要是微流控芯片, 或者說微流控與恒溫擴增技術的結合。
儀器信息網:碟式芯片不同通道的多個引物之間是否會產生干擾?
張巖博士:每個反應池是獨立的,微流控碟式芯片的設計能有效的避免交叉污染,在不同指標之間不存在干擾。對于同一個指標來說,不是多重PCR,而是針對一個序列的檢測,當然在引物的設計過程中,我們必須要考察的就是待測序列的菌種特異性。
儀器信息網:引物是否存在變性的可能?在檢測中是否有質控?
張巖博士:在 檢測中,我們有設定陽性和陰性對照,由于所有反應池里引物的包埋都是同時以同樣的方式進行的,因此我們認為,如果陽性對照可以得到陽性結果,那么其他的引 物也是能正常工作的。當然,也可以針對每一個反應池設置陽性對照,但根據我們的大量實驗驗證結果,這種設置不是必要的。