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沃特世色譜柱在中藥指紋圖譜研究中的應用

   2025-06-12 沃特世1231
  指紋圖譜作為中藥復雜樣品體系質量控制強有力的技術手段,能夠較全面反映中藥內在質量,已贏得國際上的廣泛認可并得到迅速發展。2010版中國藥典收載高效液相色譜特征圖譜7項,指紋圖譜13項,其中中成藥6項,提取物14項,為中藥產品質量的控制開辟了新途徑,成為我國中藥企業的一次重大突破。

  


  1、復方丹參滴丸

  【指紋圖譜】色譜條件與系統適用性試驗

  用Waters® ACQUITY UPLC® HSS T3(柱長為100mm,內徑為2.1mm,1.8μm)色譜柱;以含0.02%磷酸的80%乙腈溶液為流動相A,以0.02%磷酸溶液為流動相B,按中國藥典<一部>第907頁條件進行梯度洗脫;流速為每分鐘0.4ml;檢測波長為280nm;柱溫為40℃。理論板數按丹參素峰計算應不低于8000。

  

 

  2、三七三醇皂苷

  【指紋圖譜】

  按中國藥典<一部>第368頁條件運行,共有5個色譜峰,其中2號峰為三七皂苷R1,3號峰為人參皂苷Rg1,4號峰為人參皂苷Re,作為參照峰。色譜柱: Waters SymmetryShield™ RP18, 5μm ,250×4.6mm。

  

 

  3、生脈注射液、參附注射液

  【指紋圖譜】色譜條件與系統適用性試驗

  固定相采用Waters SymmetryShield RP18色譜柱(4.6mm×250mm;5.0μm);柱溫30℃,以乙腈為流動相A,以水為流動相B,梯度洗脫;檢測波長為203nm。理論板數按人參皂苷Rb1峰計算應不低于1350000。測定法 分別精密吸取參照物溶液和本品各10μl,注入液相色譜儀,測定。在8~95分鐘范圍內,應呈現十七個與生脈注射液對照指紋圖譜相對應的特征峰。按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統計算,以特征峰計算相似度,本品指紋圖譜與生脈注射液對照指紋圖譜比較,相似度應不得低于0.80。另對供試品色譜圖中所有峰面積值高于人參皂苷Rb1峰面積值的百分之五的色譜峰進行積分,非特征峰面積之和不得高于總峰面積的50%。(見國家藥典委員會關于生脈注射液、參附注射液質量標準有關內容的公示)

  

 

  中藥指紋圖譜研究的特點

  

 

  適合中藥指紋圖譜研究的Waters色譜柱推薦

  (1)適合中藥指紋圖譜研究的色譜柱推薦之T3

  

 

  XSelect™ HSS T3,采用三官能團鍵合,低配基密度(~1.6 μmol/m2)C18 烷基鏈鍵合和專利的封端技術,是沃特世公司最先進的鍵合和封端技術的有力體現。

  • 在增強極性化合物保留能力的同時,維持了對中等和強疏水化合物的適度保留能力,又稱“平衡柱”,能夠對同時包含強極性和疏水性的復雜中藥組分提供適中的保留。

  • LC-MS兼容

  • 耐受100%水相流動相

  • 分離重現性好

  對應的UPLC®色譜柱為ACQUITY UPLC HSS T3,典型應用如國家藥典委員會公示的護肝膠囊、護肝顆粒含量測定,用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1×100mm,1.7μm)分析,要求理論板數按五味子乙素峰計算不低于150000。

  (2)適合中藥指紋圖譜研究的色譜柱推薦之Shield RP18

  

 

  Shield RP18色譜柱基于沃特世專利的內嵌極性基團技術,能夠“屏蔽”(shield,英文有“護罩” 、“ 屏蔽” 的含

  義)硅膠表面的殘留硅醇基,使其不能與堿性較大的化合物發生拖尾作用。Waters Shield技術在硅膠顆粒和BEH顆粒上均高度成功, SymmetryShield RP18色譜柱在pH2-8范圍內提供獨特選擇性,峰形與分離度都顯著改善,并且完美兼容高水相條件;而BEH Shield RP18更將此諸多優勢拓展到pH2-11的寬范圍,為方法開發提供了極大靈活性。Shield RP18對含有生物堿、極性組分等中藥體系都是良好的選擇,更有相對應的ACQUITY UPLC色譜柱為獲得超高分辨率和實現快速分離提供保障。

 

 
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