液相色譜儀對食品成分分析的應用范圍
1、營養成分分析
有機酸、碳水化合物、維生素、游離脂肪酸、氨基酸
2、食品添加劑和農藥殘留分析
(1)防腐劑與甜味劑
可分離和測定濃縮果汁、軟飲料、果醬、蠔油和人造黃油中的山梨酸和苯甲酸防腐劑，也可同時分析可樂飲料中的阿斯巴甜和糖精。
(2)合成色素
(3)農藥和抗生素殘留
高效液相色譜可對飲用水、牛奶、啤酒、谷物、馬鈴薯和豬肉等食品中的農藥殘留和抗生素殘留的測定。
(4)食品毒素
高效液相色譜用于測定大豆、魚及貝類的多胺、次黃嘌呤、黃曲霉毒素、麻痹性貝毒素(saxitoxin)等食品毒素。
高效液相色譜原理：高效液相色譜是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，經進樣閥注入供試品，由流動相帶入柱內，在柱內各成分被分離后，依次進入檢測器，色譜信號由記錄儀或積分儀記錄。
1.對儀器的一般要求
所用的儀器為高效液相色譜儀。色譜柱的填料和流動相的組分應按各品種項下的規定.常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用,辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料,用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等，用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外，柱溫為室溫，檢測器為紫外吸收檢測器。在用紫外吸收檢測器時,所用流動相應符合紫外分光光度法。
正文中各品種項下規定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外，其余如色譜柱內徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當改變,以適應具體品種并達到系統適用性試驗的要求。
2.系統適用性試驗
按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗，即用規定的對照品對儀器進行試驗和調整,應達到規定的要求;或規定分析狀態下色譜柱的最小理論板數、分離度和拖尾因子.
(1)色譜柱的理論板數(n)在選定的條件下，注入供試品溶液或各品種項下規定的內標物質溶液，記錄色譜圖，量出供試品主成分或內標物質峰的保留時間t<[R]>(以分鐘或長度計，下同，但應取相同單位)和半高峰寬(W<[h/2]>),按n=5.54(t<[R]>/W<[h/2]>)<2>計算色譜柱的理論板數，如果測得理論板數低于各品種項下規定的最小理論板數，應改變色譜柱的某些條件(如柱長、載體性能、色譜柱充填的優劣等)，使理論板數達到要求。
(2)分離度定量分析時，為便于準確測量，要求定量峰與其他峰或內標峰之間有較好的分離度。分離度(R)的計算公式為：2(t<[R2]>-t<[R1]>)R=──W<[1]>+W<[2]>式中t<[R2]>為相鄰兩峰中后一峰的保留時間;t<[R1]>為相鄰兩峰中前一峰的保留時間;W<[1]>及W<[2]>為此相鄰兩峰的峰寬。除另外有規定外，分離度應大于1.5。
(3)拖尾因子為保證測量精度，特別當采用峰高法測量時，應檢查待測峰的拖尾因子(T)是否符合各品種項下的規定,或不同濃度進樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子計算公式為：W<[0.05h]>T=──────2d<[1]>式中W<[0.05h]>為0.05峰高處的峰寬;d<[1]>為峰極大至峰前沿之間的距離。除另有規定外，T應在0.95～1.05間。也可按各品種校正因子測定項下，配制相當于80%、100%和120%的對照品溶液，加入規定量的內標溶液，配成三種不同濃度的溶液，分別注樣3次,計算平均校正因子，其相對標準偏差應不大于2.0%。
3.測定法
定量測定時，可根據樣品的具體情況采用峰面積法或峰高法。但用歸一法或內標法測定雜質總量時，須采用峰面積法。
(1)面積歸一化法測定供試品(或經衍生化處理的供試品)中各雜質及雜質的總量限度采用不加校正因子的峰面積歸一法。計算各雜質峰面積及其總和，并求出占總峰面積的百分率。但溶劑峰不計算在內。色譜圖的記錄時間應根據各品種所含雜質的保留時間決定，除另有規定外,可為該品種項下主成分保留時間的倍數。
(2)主成分自身對照法當雜質峰面積與成分峰面積相差懸殊時，采用主成分自身對照法。在測定前，先按各品種項下規定的雜質限度，將供試品稀釋成一定濃度的溶液作為對照溶液，進樣，調節檢測器的靈敏度或進樣量，使對照溶液中的主成分色譜峰面積滿足準確測量要求。然后取供試品溶液，進樣，記錄時間，除另有規定外，應為主成分保留時間的倍數。根據測得的供試品溶液的各雜質峰面積及其總和并和對照溶液主成分的峰面積比較，計算雜質限度。
(3)內標法測定供試品中雜質的總量限度采用不加校正因子的峰面積法。取供試品,按各品種項下規定的方法配制不含內標物質的供試品溶液,注入儀器,再配制含有內標物質的供試品溶液，在同樣的條件下注樣。記錄的時間除另有規定外，應為該品種項下規定的內標峰保留時間的倍數，色譜圖上內標峰高應為記錄儀滿標度的30%以上，否則應調整注樣量或檢測器靈敏度。
系統控制器ProminenceCBM-20A/20Alite
CBM-20A
可連接的單元：輸液單元最多4臺、自動進樣器1臺、柱溫箱1臺、檢測器最多2臺、鎦分收集器1臺、輔助控制器最多2臺
連接單元數：8(可增至12)
數據緩沖：約24小時之1分析(采樣率500ms時，只限LCsolution使用時)
CBM-20Alite
可連接的單元：輸液單元最多4臺、自動進樣器(SIL-10AF/10AP/10A除外)1臺、柱溫箱1臺、檢測器最多2臺、輔助控制器最多2臺
連接單元數：5
數據緩沖：約24小時之1分析(采樣率500ms時，只限LCsolution使用時)
輸液單元ProminenceLC-20AD/20AT/20AB
LC-20AD
輸液方式：并聯雙柱塞
柱塞容量：10μL
最大排液壓力：40MPa
流量設定范圍：0.0001mL/min-10.0000mL/min
流量準確度：1%或0.5μL/min其中較大值以內
流量精密度：0.1%RSD以下
LC-20AT
輸液方式：串聯雙柱塞
柱塞容量：主泵頭47μL、副泵頭23μL
最大排液壓力：40MPa
流量設定范圍：0.001mL/min-10.000mL/min
流量準確度：2%或2μL/min其中較大值以內
流量精密度：0.1%RSD以下
LC-20AB
輸液方式：并聯雙柱塞(2式)
柱塞容量：10μL
最大排液壓力：40MPa
流量設定范圍：0.0001mL/min-10.0000mL/min
流量準確度：1%或0.5μL/min其中較大值以內
流量精密度：0.1%RSD以下
梯度系統
LC-20AB
梯度方式：高壓混合
混合溶劑數：2液
LC-20AD/20AT高壓GE規格
梯度方式：高壓混合
混合溶劑數：2液或3液
LC-20AD/20AT低壓GE規格
梯度方式：低壓混合
混合溶劑數：最多4液
紫外可見檢測器
ProminenceSPD-20A/20AVUV-VIS檢測器
ProminenceSPD-M20APDA檢測器
SPD-20A/SPD-20AV
光源：SPD-20AD2燈、SPD-20AVD2燈、W燈
波長范圍：SPD-20A190nm-700nm、SPD-20AV190nm-900nm
波長準確度：1nm以下
波長精密度：0.1nm以下
噪聲：±0.25×10-5AU
漂移：1×10-4AU/h
線性：>2.5AU
功能：190nm-370nm或371nm以上雙波長檢測，比例色譜圖輸出，波長掃描，時間程序
SPD-M20A
光源：D2燈、W燈
二極管元件數：512
波長范圍：190nm-800nm
波長準確度：1nm以下
波長精密度：0.1nm以下
噪聲：±0.3×10-5AU
漂移：0.5×10-3AU/h
線性：>2.0AU
功能：等高線輸出，光譜檢索，最大輸出
自動進樣器ProminenceSIL-20A/20AC
進樣方式：全量進樣，進樣量可變式
進樣量設定范圍：0.1μL-100μL(標準)，1μL-2,000μL(選購件)
試樣處理數：
175(1mL試樣瓶)
105(1.5mL試樣瓶)SIL-20AC70(1.5mL試樣瓶)
50(4mL試樣瓶)
192(96-孔MTP2塊)
768(384-孔MTP2塊)
在上述各規格外另可使用1.5mL試樣瓶10個
進樣量準確度：1%以下
進樣量精密度：0.3%RSD以下
交叉污染：0.005%以下(萘、洗必泰)
反復進樣次數：最大30/1試樣
針清洗：在進樣前后任意設定
試樣冷卻器：SIL-20A無SIL-20AC模塊冷卻加熱方式，兼除潮功能4℃-40℃
試樣架切換器
試樣架切換器A
適用板：96-孔MTP，96-孔DWP
板處理塊數：12P
試樣冷卻器：無
試樣架切換器C
適用板：96-孔MTP，96-孔DWP
板處理塊數：12P
試樣冷卻器：模塊冷卻加熱方式，兼除潮功能4℃-40℃
柱溫箱ProminenceCTO-20A/20AC
調溫方式：強制空氣循環式
冷卻方式：CTO-20A無、CTO-20AC電子冷卻式
溫度控制精密度：0.1℃以下
溫度控制范圍：CTO-20A(室溫 10)℃-85℃、CTO-20AC(室溫-10)℃-85℃
收容空間：W220×H365×D95mm
可收容儀器：手動進樣器2個，梯度混合器，高壓流路切換閥2個等
定時程序：線性溫度程序
安全措施：溶劑傳感器、溫度保險絲、上限溫度限制
高效液相色譜(LC-20A)分析結果重復性好，靈敏度高，定性定量準確，并且前處理工作強度較低，可在各級食品檢測單位中推廣應用。
