由于中國是一個人口大國，傳染病是在中國一個首當其沖的市場考慮方向。因此早期的定量PCR試劑盒企業(yè)都聚焦在這一領(lǐng)域，多為肝炎和性傳播疾病的基因檢測。商業(yè)模式上，當年的達安基因和深圳匹基對定量PCR技術(shù)的推廣功不可沒，在醫(yī)院不熟悉定量PCR技術(shù)的環(huán)境下，采取了協(xié)助醫(yī)院建立PCR實驗室—投放儀器—派駐點技術(shù)員進行現(xiàn)場支持的方式，使得定量PCR這一技術(shù)迅速在醫(yī)院推廣開來，從而讓中國在分子診斷領(lǐng)域走在了國外的前列。
基于這些企業(yè)為分子診斷市場在定量PCR儀器覆蓋度、試劑盒開發(fā)能力、技術(shù)接受程度等等方面打下的基礎(chǔ)，使得我國在后期幾次面對公共衛(wèi)生危機事件如SARS、甲流、禽流感、MERS時，都能夠及時開發(fā)出定量PCR檢測試劑盒，為控制傳染源、切斷傳播途徑、保護易感人群做出了貢獻。從90年代后期到2010年這段時間可稱為定量PCR診斷的第一波浪潮，主要是以傳染病檢測為主，代表企業(yè)為達安基因、深圳匹基、科華生物。而達安基因在最主要競爭對手深圳匹基為外企收購后，已成為國內(nèi)基因診斷市場的龍頭企業(yè)。
隨著技術(shù)的應(yīng)用不斷深入，定量PCR已經(jīng)成為診斷市場最常見、最有用的診斷平臺之一，從2010年前后開始，由于易瑞沙、特羅凱等分子靶向腫瘤藥物的出現(xiàn)，對腫瘤患者進行基因檢測的需求產(chǎn)生，廈門艾德、上海源奇等企業(yè)率先開發(fā)了針對腫瘤患者的靶向用藥基因檢測試劑盒，由于定位準確，以及與醫(yī)藥公司合作的商業(yè)模式，這幾家企業(yè)迅速得到成長。這一波可稱為定量PCR診斷的第二波浪潮，方向主要是腫瘤靶向用藥的基因檢測，與傳染病基因檢測不同，這一類檢測標本為病理組織切片樣本，由于取樣的限制，一定程度上制約了市場的擴大。
近年來，F(xiàn)DA批準的不少藥物在使用說明中都涉及到相關(guān)基因型信息，建議行基因檢測以決定是否適合用藥或調(diào)整用藥劑量。隨著這些藥物在國內(nèi)也得到臨床批準上市，相應(yīng)的靶點基因檢測開始漸漸被關(guān)注，如氯吡格雷、華法令、他莫昔芬、卡馬西平這些每年用藥量非常大的藥物，其實都需要進行基因型的診斷。
隨著國家醫(yī)療改革的進行，許多用藥將下沉至二三線診療市場，在老齡化社會之下，醫(yī)保資金持續(xù)吃緊，今年起在城鎮(zhèn)居民醫(yī)保與新農(nóng)合基礎(chǔ)上又增加了支付超50%的大病醫(yī)保，近日亦出臺文件以省為單位制定基本保險藥品支付標準，加上異地醫(yī)保支付實行、6月起大部分用藥價格上限放開，都使得地方政府不得不對醫(yī)保加強控制，而通過藥物基因組學(xué)檢測進行優(yōu)化用藥、合理用藥，對地方政府的意義其實要強過以藥品集中采購、帶量采購、二次議價來打壓藥品價格這些手段。國家衛(wèi)計委日前也出臺了藥物靶點基因檢測技術(shù)指南，為藥物基因組學(xué)檢測在規(guī)范上創(chuàng)造了發(fā)展的條件。
定量PCR已經(jīng)是很成熟的技術(shù)，研發(fā)門檻并不高，很多公司紛紛踏足。除了檢測基因多態(tài)性以外，也可以檢測基因表達量的高低。像WT1基因高表達對白血病的早期預(yù)測復(fù)發(fā)就有很強的意義。但由于缺少對整個市場的全局調(diào)研和前瞻眼光，許多人都在跟風(fēng)做著重復(fù)性的產(chǎn)品和市場。像EGFR檢測試劑盒，國內(nèi)至少有17家以上的公司在開發(fā)，而這個市場絕對容納不下17家試劑盒公司。
對于藥物基因組學(xué)的市場，目前只有少部分公司提前看到了這一市場的潛力，蘇州曠遠、武漢海吉利等公司已經(jīng)開發(fā)出相關(guān)的藥物基因組檢測試劑盒并取得了CFDA注冊證，走在了其他同行之前。藥物基因組學(xué)檢測基本為血液樣本，技術(shù)實施也在以檢驗科為主體的PCR實驗室進行，因此基因診斷龍頭企業(yè)達安基因目前也通過合作和互補研發(fā)等方式，開始布局這一市場。由于其多年P(guān)CR營銷體系優(yōu)勢無可替代，因此未來亦不可忽視。
目前進軍這一領(lǐng)域的公司，多首先關(guān)注氯吡格雷的基因檢測。但事實上，可進行基因檢測的藥物還有很多，都有待試劑盒的開發(fā)和CFDA注冊。由于這些藥物的用藥量非常巨大，因此相關(guān)的靶點基因檢測是一個處于比較早期但潛力非常大的市場，應(yīng)該會帶來第三波定量PCR診斷的浪潮。
藥物基因組學(xué)檢測的基本是單個核苷酸的變異，通俗來說可以稱為SNP(和基因點突變略有區(qū)別)，一般來說SNP很穩(wěn)定，不大會發(fā)生變化。部分人的疑問是，每個人的SNP檢測是否只要一次就夠了，這個市場是否會比較小。但實際上，由于患者對部分嚴重副反應(yīng)的擔憂，不同醫(yī)療機構(gòu)診斷的結(jié)果質(zhì)控是否完全可靠，以及SNP理論上仍有存在變化的可能，都會導(dǎo)致檢測結(jié)果陰性的患者會在以后用藥前可能繼續(xù)接受基因檢測，就像為了安全起見，患者青霉素皮試每次都要進行一樣。加上相關(guān)疾病的患病率逐年上升，這個市場可以持續(xù)增長。
從現(xiàn)有儀器市場、操作簡便性、結(jié)果準確性、管理規(guī)范性等角度來說，定量PCR無疑是藥物基因組學(xué)的最合適檢測技術(shù)方法。在試劑盒的開發(fā)方面，ARMS-PCR在準確性方面并不是一個很好的選擇。由于該方法存在著3’末端堿基錯配延伸概率偏高的固有缺陷，導(dǎo)致假陽性比較多，不利于市場的開發(fā)和擴大。綜合來看Taqman技術(shù)仍然是最佳的方法。
市場現(xiàn)實是熒光定量PCR儀多數(shù)為Applied Biosystems的各類型號，選擇熒光方面，如果是FAM和HEX熒光，容易產(chǎn)生FAM熒光偏強抑制HEX熒光的現(xiàn)象，對結(jié)果的判讀有影響。FAM和VIC熒光的波長相距較遠不易干擾，其實仍是最好的搭配。除了VIC熒光外，也可以嘗試FAM加JOE熒光的搭配而淬滅熒光可考慮不用TAMRA，這樣省出來一個熒光通道可以再用NED熒光標記一個靶標。
另外，熒光定量PCR儀在臨床應(yīng)用方面，國產(chǎn)儀器和進口儀器差距已經(jīng)越來越小，未來這一市場國產(chǎn)化、自動化是大趨勢不可阻擋，試劑盒廠家為了更加適應(yīng)二三線醫(yī)療市場的需求，必然會向這些方面不斷調(diào)整。
作者介紹：
本文作者柴映爽，上海醫(yī)科大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)士和國家CDC病毒所基因工程學(xué)碩士。曾在歐美制藥公司工作，2004年初進入Life Technologies 的前身Applied Biosystems公司工作至今，見證了十年來中國基因科學(xué)和分子診斷的飛速發(fā)展。個人興趣在于研究基因科學(xué)的最新成就，致力于推動成熟的基因科學(xué)成果進入中國分子診斷市場并得到健康持續(xù)的發(fā)展，使得中國的患者能夠受益于最新的分子診斷技術(shù)。
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