中文名稱：考馬斯亮藍G250。二甲花青亮藍
英文名稱：Coomassie Brilliant blue G-250 (C.I. 42655)，rilliant blue G 
分子量：854.04 g/mol 
分子式：C47H48N3NaO7S2 
CAS NO.：6104-58-1 
λmax. (buffer pH 7.0)：577 - 584 nm 
E 1 %/1 cm, λmax. (pH 7.0)：450 - 570 
用途：亮藍G250，是一種甲基取代的三苯基甲烷，染色靈敏度不如R250，但比氨基黑高3倍，馬斯亮藍G-250在游離狀態下呈紅色，最大光吸收在465nm；當它與蛋白質結合后變為青色，蛋白質-色素結合物在595nm波長下有最大光吸收。其光吸收值與蛋白質含量成正比。 考馬斯亮藍G250是布拉德福德(Bradford)蛋白質定量試劑的主要成分。它在三氯乙酸中不溶而成膠體，能選擇地染色蛋白而幾乎無本底色。所以常用于需要重復性好和穩定的染色，適于作定量分析。G250常用的蛋白染料，作定性試驗用,染色后為藍綠色

考馬斯亮藍法測定蛋白質含量
　　該方法用于大多數蛋白質的定量是比較精確的，但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0．2%影響測定結果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。常用于細胞骨架的檢驗。 
1．Bradford濃染液的配制：
　　將100mg考馬斯亮藍G-250溶于50m1 95%乙醇，加入100ml濃磷酸，然后，用蒸餾水補充至200ml，此染液放4℃至少6個月保持穩定。 
2．標準曲線蛋白質樣本的準備：
　　盡量使用與待測樣本性質相近的蛋白質作為標準品，例如測定抗體，可用純化的抗體作為標準。如果待測樣本是未知的，也可用抗體作為標準蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之間繪制標準曲線。 
3．溶解：
　　將待測樣本溶于100~1緩沖溶液中，該緩沖溶液應與制作標準曲線的緩沖溶液相同(最好用PBS)。 
4．稀釋：
　　按1：5用蒸餾水稀釋濃染料結合溶液，如出現沉淀，過濾除去。 
5．作用：
　　每個樣本加5ml稀釋的染料結合溶液，作用5～30min。染液與蛋白質結合后，將由紅色變為藍色，在595nm波長下測定其吸光度。注意，顯色反應不得超過30min． 
6．計算：
　　根據標準曲線計算待測樣本的濃度。 

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產品詳情
AppliChem  A3480 Coomassie Brilliant blue G-250 (C.I. 42655) 10g,25g,100g

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